Author	ปิยธิดา พงษ์ศิริ
Title	การพัฒนามัลติเพล็กเรียลไทม์พีซีอาร์เพื่อการตรวจหาไวรัสชิคุนกุนยาและไวรัสเดงกี / ปิยธิดา พงษ์ศิริ = Development of multiplex real-time PCR for detecting chikungunya virus and dengue virus / Piyathida Pongsiri
Imprint	2553
Connect to	http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/32385
Descript	ก-ฏ, 72 แผ่น : ภาพประกอบ, แผนภูมิ

ไวรัสชิคุนกุนยาและไวรัสเดงกีเป็นไวรัสที่มียุงเป็นพาหะนำโรค ซึ่งไวรัสทั้งสองชนิดนี้เป็นไวรัสที่มีความสำคัญเนื่องจากเป็นสาเหตุของโรคไข้เลือดออก นำไปสู่การเสียชีวิตได้ โดยมีรายงานว่าในปี 2552 สำหรับเชื้อไวรัสชิคุนกุนยาที่ระบาดในไทยมีประมาณ 40,000 รายและ สำหรับสถิติทั่วโลกของไวรัสเดงกีมีผู้ติดเชื้อประมาณ 50 ล้านคนต่อปี และมีผู้เสียชีวิตประมาณ 25,000 คน นอกจากนี้ อาการโดยทั่วไปของการติดเชื้อไวรัสทั้งสองชนิดยังมีอาการใกล้เคียงกันและยังใกล้เคียงกับการติดเชื้อไวรัสตัวอื่นๆ หรืออาการหวัดทั่วๆไป นอกจากนี้ไวรัสชิคุนกุนยาสามารถทำให้เกิดอาการเรื้อรังได้ ดังนั้นวิธีการตรวจที่มีประสิทธิภาพและมีความน่าเชื่อถือจึงสำคัญ เพื่อประโยชน์ต่อการเฝ้าระวังและการรักษาโรคที่ถูกต้อง การศึกษานี้จึงได้ศึกษา complete genome ของไวรัสชิคุนกุนยา เพื่อศึกษาทางด้านลักษณะพันธุกรรมเพื่อดูว่ามีความใกล้เคียงกับสายพันธุ์ใดที่ระบาดและใช้เป็นข้อมูลเบื้องต้นในการพัฒนาวิธีการตรวจต่อไป โดยผลการศึกษาพบว่าไวรัสชิคุนกุนยาที่พบในประเทศไทยจัดอยู่ในสายพันธุ์ ECSA ซึ่งต่างจากการระบาดในอดีตที่ระบาดโดยสายพันธุ์ Asian จากนั้นจึงพัฒนาวิธีการตรวจไวรัสชิคุนกุนยาและไวรัสเดงกีโดยวิธีมัลติเพล็กเรียลไทม์ฑีซีอาร์ เพื่อความน่าเชื่อถือ รวดเร็ว และจำเพาะต่อไวรัสทั้งสองชนิดโดยผลการพัฒนาวิธีการนี้พบว่า มีประสิทธิภาพสูง มีความจำเพาะ น่าเชื่อถือ สามารถทำซ้ำได้ และไม่มีปฏิกิริยาข้ามต่อไวรัสทั้งสองชนิด และไวรัสชนิดอื่นๆ เช่นไวรัสตับอักเสบ ชนิด เอ, ซี, อี (Hepatitis A, C and E) หรือ ไวรัสที่ทำให้เกิดโรคไข้สมองอักเสบ (Japanese encephalitis virus, JEV) โดยเมื่อนำวิธีมัลติเพล็กเรียลไทม์ฑีซีอาร์ของทั้งไวรัสชิคุนกุนยาและไวรัสเดงกี ทดสอบกับตัวอย่างจำนวน 290 ตัวอย่าง ที่เป็นตัวอย่างทางคลินิกพบว่าวิธีการนี้มีความจำเพาะ 92.59%, ความไว 97.65% และความแม่นยำถึง 95.82% เมื่อเปรียบเทียบกับวิธีการพีซีอาร์ปกติ
Chikungunya Virus (CHIKV) and Dengue Virus (DENV) are both Arthopod-borne viruses (Arboviruses) which raise public health concern. In Thailand, there was a report of CHIKV infection about 40,000 cases in 2009 and this virus could cause long term symptoms. DENV cause Dengue Fever and Dengue Hemorrhagic Fever (DF/DHF) with an estimated more than 50 million people per year and 25,000 deaths. Both viruses also share common clinical signs such as the febril of onset and rash. Detecting CHIKV and DENV is crucial role for the doctor and the doctor can give the appropriate treatment to the patients and monitor the patient closely. Our study has focused on characterizing complete genome of CHIKV and found that the virus spreading in Thailand were categorized into ECSA strain which were different than the strain spreading in the past which were Asian strain. Then we study the development of multiplex real-time PCR for detecting CHIKV and DENV which is rapid, reliable, and specific to both viruses. Our result showed that this assay has high efficiency, sensitivity and specificity. Moreover, when our method was tested against other virus such as Hepatitis A, Hepatitis C, Hepatitis E and Japanese encephalitis virus, it showed no cross-reaction. Total of 290 clinical samples were tested and showed that our method has 92.59%

1. เดงกีไวรัส
2. ไวรัสชิคุนกุนยา
3. จีโนม
4. การตรวจคัดโรค
5. Dengue viruses
6. Chikungunya viruses
7. Genomes
8. Medical screening

LOCATION	CALL#	STATUS
Central Library @ Chamchuri 10 : Thesis	531704	LIB USE ONLY
Medicine Library : Thesis	ป618ก 2553	CHECK SHELVES