AuthorAnupan Kongbangkerd, author
TitleMicropropagation of Carthamus tinctorius Linn. by tissue culture to improve fatty acid production / Anupan Kongbangkerd = การขยายพันธุ์คำฝอย (Carthamus tinctorius Linn.) ด้วยวิธีเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ เพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพของการผลิตกรดไขมัน / อนุพันธ์ กงบังเกิด
Imprint 1995
Connect tohttp://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/72750
Descript xvi, 145 leaves : ill., charts

SUMMARY

The procedures for callus induction and plant regeneration from tissues and callus of Carthamus tinctorius Linn. Cv. Manjira were studied and developed. The optimal conditions for callus induction and plant regeneration were observed when transversely cut-upper part of 14 days old cotyledons were previously incubated for 2 weeks in the dark on MS medium supplemented with 0.5 mg/l NAA, 0.5 mg/l BA and 2.0 %(w/v) sucrose. Addition of 1.65 g/l NH4NO3 could facilitate shoot formation from cultured cotyledon callus. The presence of AgNO3 (3.0 mg/l) or CoCl2 (5.0 mg/l) in MS medium supplemented with optimal plant growth regulators also enhanced the yield of shoot formation. Root induction was occurred on full-strength MS medium without plant growth regulators. Total lipid and fatty acid compositions of Carthamus tinctorius Linn. Tissues and callus were also studied and analysed by gas chromatography (GC). Palmitic acid (Cl6:0), stearic acid (Cl8:0), oleic acid (Cl8:1) and linoleic acid (Cl8:2) were detected in the developmental stages of natural explants and callus tissues. Furthermore, the total lipid contents of explants were remarkably high in seeds and gradually decreased in cotyledon explant. The main fatty acid components found in natural explants were unsaturated fatty acids (Cl8:1 and Cl8:2) which were higher than that of saturated fatty acids (Cl6:0 and Cl8:0). The growth rate of dark grown cotyledon callus was higher than that of light grown callus. Maximum content of total lipid was observed at the second weeks of culture. The main fatty acids found in both type of calli were palmitic acid (Cl6:0) and stearic acid (Cl8:0). MS medium supplemented with 2,4-D or NAA at 0.5 mg/l in combination with AB or Kn in MS medium yielded higher content of total lipid than that with other auxins. The highest level of palmitic acid (Cl6:0) was detected in callus grown in MS medium containing NAA plus BA while the highest level of linoleic acid (Cl8:2) was detected in the medium having 2,4-D plus Kn. Carthamus tinctorius Linn. Cotyledon callus cultured on the medium containing 20 g/l sucrose yielded the highest content of total lipids with palmitic acid (Cl6:0) as the major saturated fatty acid.
ได้ศึกษาพัฒนาวิธีการชักนำและเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแคลลัสของคำฝอย (Carthamus tinctorius Linn.) ในระบบ in vitro พร้อมทั้ง สภาวะที่เหมาะสมในการหวนกลับคืนเป็นต้น (regeneration) ผลปรากฎว่าแหล่งของเนื้อเยื่อที่เหมาะสม คือ ใบเลี้ยงส่วนบนที่ตัดขวางผ่านเส้นกลางใบที่ได้จากต้นกล้าที่เพาะจากเมล็ดในสภาวะปลอดเชื้อในที่มืดเป็นเวลา 14 วัน เมื่อเพาะเลี้ยงในอาหารสูตร MS ที่เสริมด้วย NAA และ BA ที่ความเข้มข้นเท่ากันคือ 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตรและน้ำตาล 20 กรัมต่อลิตร โดยทำการเลี้ยงไว้ในที่มืดเป็นเวลา 2 สัปดาห์ก่อนนำออกเลี้ยงในสภาวะที่มีแสง (16/8 hrs. photoperiod). การเสริม NH4NO3 (1.65 กรัมต่อลิตร) ลงในอาหารเพาะเลี้ยงสูตร MS สามารถเพิ่มการชักนำให้เกิดต้นได้ดีขึ้น การเติม AgNO3 (3.0 มิลลิกรัมต่อลิตร) หรือ CoCl2 (5.0 มิลลิกรัมต่อลิตร) ลงในอาหารที่ใช้ในการเลี้ยงเนื้อเยื่อสามารถชักนำให้เกิดการกลับคืนเป็นต้นใหม่ได้ สภาวะที่เหมาะสมในการชักนำให้เกิดรากคือ การเลี้ยงส่วนต้นที่ได้จากการเพาะเลี้ยงบนอาหารเต็มสูตร MS ที่ไม่มีการเสริมด้วยฮอร์โมน สำหรับการศึกษาการเปลี่ยนแปลงระดับของไขมันและกรดไขมันที่เป็นองค์ประกอบในเนื้อเยื่อคำฝอยเริ่มต้นและแคลลัสของคำฝอยที่อยู่ในช่วงของการเจริญและพัฒนาโดยใช้เทคนิคทางแก๊สโครมาโทกราฟี พบว่า ผลรวมของระดับกรดไขมันชนิดไม่อิ่มตัวในเนื้อเยื่อคำฝอยเริ่มต้น (เมล็ด) คือ กรดโอลิอิค (Cl8:1) และกรดลิโนเลอิค (Cl8:2) จะสูงกว่าผลรวมของระดับกรดไขมันอิ่มตัวคือ กรดปาล์มิติค (C16:0) และกรดสเตียริค (C18:0) และพบองค์ประกอบของกรดไขมันชนิดอื่นในปริมาณที่ต่ำมาก ซึ่งปริมาณสะสมของไขมันภายในเมล็ดคำฝอยจะสูงกว่าปริมาณที่ควรจะพบในใบเลี้ยงอย่างชัดเจน นอกจากนี้ยัง พบว่า ระดับของไขมันในใบเลี้ยงจะลดลงเมื่ออายุใบเลี้ยงมากขึ้น และระดับของไขมันในแคลลัสที่เลี้ยงในที่มืด มีอัตราการเจริญสูงกว่าแคลลัสที่เลี้ยงในที่สว่างที่ทุกระยะของการเจริญ และมีเปอร์เซ็นต์น้ำมัน (total lipid content) สูงสุดที่สัปดาห์ที่ 2 ของการเจริญ โดยกรดไขมันที่เป็นองค์ประกอบหลักที่พบทั้งในแคลลัสที่เลี้ยงในที่มืดและที่สว่าง คือ กรดปาล์มิติค (Cl6:0) และกรดสเตียริค (Cl8:0) จากการศึกษาผลกระทบของฮอร์โมนในอาหารต่อการเปลี่ยนแปลงระดับของกรดไขมัน พบว่า แคลลัสที่เลี้ยงในอาหารที่เสริมด้วย 2,4-D หรือ NAA ร่วมกับ BA หรือ Kn จะมีเปอร์เซ็นต์น้ำมันสูงกว่าแคลลัสที่เลี้ยงในอาหารที่เสริมด้วยฮอร์โมนชนิดอื่น โดยมีกรดปาล์มิติค (Cl6:0) เป็นองค์ประกอบหลักในแคลลัสที่เลี้ยงในอาหารที่เสริมด้วย NAA ร่วมกับ BA และกรดลิโนเลอิค (Cl8:2) เป็นองค์ประกอบหลักในแคลลัสที่เลี้ยงในอาหารที่เสริมด้วย 2,4-D ร่วมกับ Kn แคลลัสคำฝอยที่เลี้ยงในอาหารที่เสริมด้วยน้ำตาล 20 กรัมต่อลิตร จะมีระดับของไขมันรวมสูงกว่าที่ความเข้มข้นอื่น ๆ และมีกรดปาล์มิติค (Cl6:0) เป็นองค์ประกอบหลักในไขมันเช่นกัน


SUBJECT

  1. Safflower
  2. Plant tissue culture
  3. Fatty acids
  4. คำฝอย (พืช)
  5. การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช
  6. กรดไขมัน